Felszámolja a rákos daganatot a géltapasz | Mandiner

Vastagbélrák génterápia, A vastagbélrák kezelése

Génterápia Absztrakt Az onkolitikus vírus által fegyveres génterápia új kezelési lehetőségeket kínálhat és javíthatja a vastagbélrákos betegek előrejelzését.

Ebben a tanulmányban arra törekedtünk, hogy tovább igazoljuk az onkolitikus vírus által fegyveres tumort nekrózis faktorral összefüggő apoptózist indukáló ligandum TRAIL génterápia daganatellenes hatását xenograftban, amely vastagbélrákos betegek daganatából származik. E célból xenotranszplantálható daganatokat állítottunk elő friss műtéti mintákból. Ezen xenograftok szövettana megtartotta vastagbélrák génterápia eredeti daganatok jellemzőit meztelen egerek passzálása során.

Ezenkívül az egerekben nem találtunk nyilvánvaló kezeléssel kapcsolatos toxicitást. Eredményeink azt mutatják, hogy egy onkolitikus adenovírusvektor alkalmazása a TRAIL génterápiával kombinálva ígéretes új módszer a rákterápiában.

Bevezetés A vastagbélrák a világ harmadik leggyakoribb rosszindulatú daganata. Ennek a betegségnek az éves előfordulása 1, 02 millió volt a Az egyik ilyen rákellenes terápiás szer a tumor nekrózis faktorral összefüggő apoptózist indukáló ligandum TRAILmás vastagbélrák génterápia Apo-2L néven ismert, amely a tumor nekrózis faktor családjába tartozik.

A közelmúltban a viroterápiát széles körben vizsgálták a rákterápia lehetséges hatékonysága szempontjából. A viroterápia onkolitikus vírusokat alkalmaz, amelyek szelektíven replikálódnak, és így elpusztítják a tumorsejteket.

És III. Stádiumú klinikai vizsgálatokban alkalmaztak hasnyálmirigy- máj- fej- és nyakrák esetén. Kínában a Het, ennek a vektornak a modifikációját, klinikailag jóváhagyták számos rosszindulatú daganat kezelésére.

vastagbélrák génterápia milyen eszközökkel szabadulhat meg a parazitáktól

Ezeket steril körülmények között, kórokozó-mentes környezetben helyezték el. Az egereket steril vízzel és élelemmel láttuk el ad libitum segítségével, és az összes manipulációt aszeptikusan végeztük egy lamináris áramlású burkolatban. Állatkísérleteket a Zhejiangi Egyetem állategészségügyi intézményi irányelveinek megfelelően végeztek. Beteg daganatok Vastagbéldaganat-szöveti mintákat vettünk 21 vastagbélrák génterápia betegtől, akik műtét alatt álltak a Sir Run Run Shaw Kórházban Hangzhou, Kína a műtét idején, miután a beteg tájékozott írásbeli hozzájárulását megkaptuk.

Az összes mintát primer daganatokból vettük.

vastagbélrák génterápia condiloame bepanten

A daganatok xenograftjainak kialakítása A daganatos szöveteket szikével 3—4 mm-es darabokra vágtuk. Avertin érzéstelenítés után a frissen előállított műtéti mintákat darabokra szubkután sc implantálták 3—4 meztelen egerekbe 2 órán belül, a minták műtét során történő összegyűjtése után.

Ezeket az egereket addig figyeltük, amíg a daganatuk el nem érte az 1 cm átmérőt, majd a tumort eltávolítottuk és új egerekbe implantáltuk több generáció előállítása céljából. A második passzálás után 1—2 cm-es daganattal rendelkező egeret használtunk donorként vastagbélrák génterápia daganatok beültetésére más kísérleti egerekbe.

Felszámolja a rákos daganatot a géltapasz | Mandiner

Az egereket véletlenszerűen osztottuk el a kontroll vagy kezelési csoportokba. A megadott időpontokban az egereket méhnyak diszlokációval elpusztítottuk, a daganatokat boncolással eltávolítottuk és semleges pufferolt formalinnal rögzítettük a további vizsgálathoz.

A betegek daganatos szöveteinek morfológiáját összehasonlítottuk a megfelelő xenograftokkal, hematoxilin és eozinnal festett paraffinba ágyazott metszetek felhasználásával. A vektor amplifikációt, a tisztítást, a titrálást és a minőségi teszteket a korábban leírtak szerint végeztük. Így vírusrészecske fertőzésének sokszínűsége egyenértékű volt 1—3 fertőző egység fertőzésének sokszínűségével. A vastagbélrák génterápia víruskészítményeket úgy határozták meg, hogy mentesek a vad típusú adenovírussal vagy endotoxinnal való szennyeződéstől.

Kezelési protokoll Az emberi vastagbéldaganat fragmenseit sc-vel implantáltuk meztelen egerekbe. Mindegyik kezeléshez μl PBS-t 2, 5 x vírusrészecskével vagy anélkül adenovírussal injektáltunk intratumorálisan egy es méretű tűvel. A kezeléseket három naponta megismételjük, összesen négy kezelést. Az egereket füljelölték, hogy az egyes állatokból nyert adatok nyomon követhetők legyenek.

Hírek az Avemarról:

Az egereket legyőzték, amikor a daganatok átmérője elérte az 1, 5 cm-t, vagy fekélyesedtek. A kezelések toxicitásának felméréséhez vérmintákat vettünk az egerek farokvénájából az utolsó injekció beadása után 2 nappal, vastagbélrák génterápia megmértük a szérum májenzimek koncentrációját, a vérsejtszámot vörösvértestek és fehérvérsejteka hemoglobinkoncentrációkat és vérlemezke szintje.

Ugyanebben az időben mindegyik csoportban egy egert elpusztítottak, és több szervet máj, tüdő, vese és szív is boncolással eltávolítottak, semleges pufferolt formalinnal rögzítették vastagbélrák génterápia beágyazták a paraffinba a kórszövettani változások felmérése céljából.

Mindegyik daganatot csak egyszer kezeltük, és 2 nap elteltével a daganatokat eltávolítottuk az in vivo adenovírus replikációs vizsgálat és a terminális dezoxiribonukleotid-transzferáz-mediált nick-end jelölési vizsgálat elvégzéséhez.

A daganatok 4 μm vastag paraffinszelvényeit xilolban paraffinmentesítjük és csökkentett etanol-koncentrációban rehidráljuk. PBS-sel való mosás után a metszeteket terminális dezoxiribonukleotid-transzferázzal inkubáltuk nedvesített kamrában 37 ° C-on 60 percig.

PBS-ben történő öblítés után a metszeteket torma-peroxidázzal inkubáltuk nedvesített kamrában 37 ° C-on 30 percig.

Vastagbélrák génterápia Megkapta az engedélyt a leukémia elleni génterápia | naposoldal.co.hu

Hematoxilint használtunk ellenfestékként. Az apoptózis mennyiségi meghatározása céljából patológus legalább sejtet megszámolt mikroszkóppal több véletlenszerű mezőben. Az apoptotikus sejtek számát elosztottuk a megszámolt sejtek teljes számával, vastagbélrák génterápia az eredményt az apoptotikus sejtek százalékában fejeztük ki.

In vivo adenovírus replikációs vizsgálat Az adenovírus in vivo replikációjának hatékonyságának felmérése érdekében 2 nappal a különféle adenovírusokkal végzett együttes kezelés után egész daganatokat eltávolítottuk az egerekből.

A daganatokat 0, 5 ml profilaktikus féreghajtó PBS-ben homogenizáltuk és centrifugáltuk.

A vírusvektor replikációs sebességét a tumor lizátum felülúszójában a szövettenyészet fertőző es adagjának vizsgálatával határoztuk meg friss sejtekben, a korábban ismertetett módon. A GraphPad Prism 5. A kezelési csoportok közötti különbségeket egy varianciaanalízissel és varianciaanalízissel végeztük Bonferroni utótesztekkel. A túlélési görbéket a Kaplan — Meier módszer szerint ábrázoltuk, és a kezelési csoportok közötti túlélési frakciókat log-rank teszt elemzésekkel hasonlítottuk össze.

A -0, 05 P- értéket szignifikáns különbségnek tekintjük. Eredmények K vastagbéldaganat műtéti mintáinak xenograftjai létrehozása Vastagbélrák génterápia 21 műtéti mintát implantáltunk humán vastagbéldaganatokból meztelen egerekbe. A 21 minta közül 3 daganatnövekedést eredményezett a graft helyén, és mindegyiket sorozatátültetés útján tartották fenn akár 10 passzázsig. Ezeket a beteg tumorsejteket a továbbiakban 1618 és 21 daganatoknak nevezik. Megfelelő xeno-transzplantátukat 16 x, 18 x és 21 x tumoroknak nevezzük.

Az összes xenograft közvetlenül a transzplantáció után áthatolt a tumor regressziójának kezdeti szakaszában, amelyet egy tapintható kakukkparaziták tünetei újbóli megjelenése és a progresszív tumornövekedés követte. A 16 x, 18 x és 21 x daganatok késleltetése az átültetés és a daganatméret mm 3 közötti késése nagyon változó volt, 15, 30 és 18 napos értékekkel.

Megduplázódási idejük, amelyet azon időtartam alatt mértek, amelytől a daganat ről mm3-re nőtt, 11, 8 és 5 nap volt. Ezeket a paramétereket a harmadik és ötödik szakaszok között mértük, és az egyes szakaszok között kevés eltérés volt tapasztalható.

vastagbélrák génterápia festmények emberi táblákon

A növekedési sebességnek ez a heterogenitása valószínűleg a betegek közötti különbségeket tükrözi. Megvizsgáltuk az egerek tüdejét, szívét, máját és veséjét is, amikor a daganatok tömege elérte az etikusnak ítélt maximális méretet, mielőtt megölné a metasztázisok keresése céljából, de egyiket sem találtak. Az eredeti daganatok szövettani és xenograftjainak összehasonlítását mind a korai első-harmadikmind a későbbi passzázsok során megfigyelhető módosítások nélkül végeztük.

Ezeknek vastagbélrák génterápia daganatoknak a szövettani kiértékelése azt mutatta, hogy az átültetett daganatok a megfigyelt szövettani tulajdonságok szempontjából figyelemre méltó mértékben hasonlítanak az eredeti daganatokhoz. Az eredeti 16 daganat mérsékelten jól differenciált adenokarcinómát mutatott 1a. Ábraamelynek korai passzulációi 1b ábra és későbbi passzái 1c ábra ugyanazt a differenciációt és morfológiát mutatták.

vastagbélrák génterápia aki megégette a fórum szemölcsét

Az eredeti 18 daganat mérsékelten jól differenciált adenokarcinómát mutatott 1d ábra. Ezek a morfológiai tulajdonságok megőrződtek a korai 1e. Ábra és a későbbi 1f.

Ábra transzplantáció után. Az eredeti 21 tumor 1g ábraközepesen vagy rosszul differenciált adenocarcinoma, amelynek kezdeti xenograftja 1h ábra vastagbélrák génterápia a legutóbbi transzplantáció 1i ábra ugyanazokkal a morfológiai tulajdonságokkal rendelkezett. A betegek vastagbélrákjának szövettani jellemzői és a hozzájuk tartozó xenograftok.

A precíziós medicinában rejlő lehetőségek

Az első injekció beadását követő 1 hónapban a daganat mennyiségét 2 naponta megfigyeltük. A bemutatott értékek a középérték ± sd b daganatot hordozó egerek Kaplan — Meier túlélési görbéi. A bemutatott értékek a középérték ± sd vastagbélrák génterápia 18 x-es daganatokat hordozó egerek Kaplan — Meier túlélési görbéi.

A bemutatott értékek a középérték ± sd f 21 x daganatot hordozó egerek Kaplan — Meier túlélési görbéi. A Ezenkívül meghatározzuk az egyes egér testtömegét a kezelés megkezdése előtt és az első kezelés után 1 hónappal.